《求生之路2》共有四位主要玩家角色，除此之外则有多个非玩家角色（或敌对角色）。
让我们来看看四位主要角色。
比尔（Bill）：比尔是一个老练的战士，曾经在越南战争中服役，并因其丰富的战斗经验而获得队伍的信赖。他的外观特点是戴着一顶军帽、身穿迷彩军装，轻烟斗。比尔有着英勇果断、无私牺牲的精神，常在关键时刻向队友伸出援手。
佐伊（Zoey）：佐伊是一个大学生，她的目标是成为一名电影制片人。佐伊充满了独立与坚韧的女性力量，她以电影知识和僵尸电影作比喻来提醒队友面对危机。佐伊常穿一身紧身衣、牛仔裤和红色外套，梳着马尾辫，独特且醒目。
陆易斯（Louis）：陆易斯是一个IT分析师，他富有乐观主义精神，经常为队伍带来积极的动力。他在战斗中依赖高科技装备，因此他的皮肤与其他角色相比，穿着更为现代化。虽然他经常乐观地看待情况，但他也知道何时应该认真对待。
弗朗西斯（Francis）：弗朗西斯是一个硬派摩托车手，他的粗砺外表和暴力行为常给人留下深刻印象。他有着自己的荣誉感，并对团队的安全非常投入。他的标志性装扮是一身黑色的皮衣和他的充满力量的胡须。
我们来看一下非玩家角色，或说敌对角色。
普通感染者：这是游戏中最普通的僵尸类型，通常以群体出现，对玩家们构成威胁。
烟雾者：这种僵尸可以远距离抓取玩家，然后向他们吐出烟雾，造成伤害。
疾跑者：这种僵尸移动速度极快，可以迅速接近玩家，给玩家带来直接的伤害。
胖子：这种僵尸体形庞大，不仅拥有高耐久度，而且拥有向周围玩家喷射有毒绿色粘液的能力。
巨人：这是游戏中最难对付的僵尸，他们几乎无法杀死，需要玩家们共同协作才能成功。而巨人的每次攻击都会让玩家陷入危机。
复杂而丰富的角色设定让《求生之路2》在僵尸题材的游戏中独树一帜，对玩家来说，无论是单打独斗还是团队协作，都有着无尽的乐趣和挑战。
